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Kininogen D5和TRAIL融合蛋白的克隆表达及生物学活性的研究
作者:宗英 孙铭娟 董晓毅 高云 王梁华 焦炳华     
单位:第二军医大学基础部生物化学和分子生物学教研室 上海 200433 
关键词:激肽原   肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体   增殖抑制   血管生成抑制因子 
分类号:R966
出版年,卷(期):页码:2008,15(1):1-2
摘要:

用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合编码序列,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经AmyloseResin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白.结果表明MBP-KT对胰腺癌细胞1990有明显的杀伤作用其作用的ED5.为20 ng/ml,而MBP-TK对1990的抑制作用不明显;同时,MBP-KT和MBP-KD5对内皮细胞ECV304有明显的抑制作用,MBP/KT作用于ECV304的ED50为0.1μg/ml,MBP/KD5作用于ECV304的ED50为9.5μg/ml,但是MBP-TK和TRAIL几乎无作用,表明融合蛋白KT既具抗肿瘤作用又有抗新生血管的作用.本研究为进一步开发靶向性杀伤肿瘤药物奠定了基础.

基金项目:
上海市现代生物与新药产业发展基金
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